用電熱恒溫培養(yǎng)箱對志賀氏菌進(jìn)行操作

志賀氏菌顯色培養(yǎng)基在微生物檢測中常用于用于志賀氏菌的選擇性分離和初步鑒別。

培養(yǎng)基原理：蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;抑制劑抑制雜菌的生長;酚紅是pH指示劑，發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌呈黃色;混合色素對應(yīng)的酶發(fā)生特異性反應(yīng)，水解底物，釋放出顯色基團(tuán)。

志賀氏菌顯色培養(yǎng)基配方(每升)：

　　蛋白胨 9 g

　　酵母膏粉 3 g

　　氯化鈉 5 g

　　糖類 15 g

　　瓊脂　15 g

　　酚紅 0.1g

　　混合色素　2.1g

　　抑制劑 2 g

　　添加劑　10 g

　　終pH 6.8±0.2

使用方法：

　　1、稱取51.2 g志賀氏菌顯色培養(yǎng)基，加入970 mL蒸餾水或去離子水(可按比例擴(kuò)大增或縮小)，攪拌加熱煮沸至*溶解(避免過度加熱)，無需高壓滅菌，冷至50~55℃左右備用;

　　2、用30 mL蒸餾水或去離子水溶解1瓶添加劑(SR0440)，充分混勻直至溶液變成淡黃色，使用0.45 μm或0.22 μm的濾膜過濾除菌，無菌操作加入到已冷卻至50~55℃的970 mL培養(yǎng)基基礎(chǔ)中(可按比例擴(kuò)大或縮小)，充分混勻后傾注平板備用;

　　3、待檢樣品按照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)(GB、SN、FDA等)進(jìn)行取樣及前增菌，挑取一環(huán)增菌液劃線接種于制備好的該培養(yǎng)基上，于電熱恒溫培養(yǎng)箱36±1℃培養(yǎng)20~24 h，觀察結(jié)果，挑取典型或可疑志賀氏菌單菌落進(jìn)行生化驗證試驗。

質(zhì)量控制：本品傾注平板后呈橙紅色，下列菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)20~24 h生長情況如下表:

培養(yǎng)基貯 存：貯存于2~8℃、避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。

規(guī) 格：可配置1000 mL的培養(yǎng)基干粉。